Применение мутагенов при отдаленной гибридизации
В настоящее время проводятся широкие исследования по искусственному мутагенезу растений с помощью ионизирующих излучений, химических мутагенов и других методов.
Наряду с другими возможными путями применения искусственного мутагенеза целесообразно использовать мутагенные факторы для полиплоидизации промежуточных стерильных отдаленных гибридов вишни и сливы. В частности, это относится к слабоплодовым отдаленным гибридам вишни и черешни, а также стерильным гибридам между гексаплоидными и диплоидными представителями рода Prunus и гибридами сливы и терна с персиком, бессеей, абрикосом и др.
Как известно, при отдаленных скрещиваниях разнохромосомных представителей как плодовых, так и других растений часто образуются стерильные или слабоплодовитые формы с промежуточным числом хромосом. В таком случае селекционерам нужно добиться аллополиплоидности, то есть полиплоидии за счет кратного увеличения набора хромосом определенного отдаленного гибрида. При этом есть возможность повысить плодовитость отдаленных гибридов вплоть до получения высокоплодовитых форм.
В некоторых случаях целесообразно использовать аутополиплоидию. Например, имеются работы о полиплоидизации Prunus salicina (2n = 2x = 16) для последующего скрещивания с Prunus domestica (2n = 6x = 48).
Одним из наиболее изученных мутагенов является алкалоид колхицин. Он применяется для получения полиплоидных форм при обработке семян, точек роста, почек и других частей растений.
В.А. Рыбин, касаясь обработки колхицином древесных растений, пишет, что удобно на распускающихся почках помещать вату, предварительно смоченную в растворе колхицина. Вату периодически в течение нескольких дней пропитывают раствором колхицина.
Имеются рекомендации по применению желатиновых капсул с соответствующими концентрациями колхицина и агар-агара. В частности, В.А. Рыбин приводит опыты Хантера по искусственному получению тетраплоидных растений яблони. Описаны примеры применения колхицина, приготовленного с трагантом, а также использования ланолиновой пасты колхицина. Последний состав интересен тем, что он может действовать довольно продолжительное время. Но недостатком этого способа является то, что обработка ланолиновой пастой колхицина вызывает ожоги.
Я.Г. Оголевец в опытах по методике полиплоидии показала, что удобно использовать раствор колхицина в касторовом масле. Этот раствор не вызывает ожогов, обладает высокой проникающей способностью к точкам роста и сохраняется в течение длительного времени. По данным Я.Г. Оголевец, раствор сохраняет свое действие в течение всего летнего периода. Раствор колхицина в касторовом масле можно применять в открытом грунте.
Для приготовления раствора колхицина в касторовом масле (по Я.Г. Оголевец) берут отвешенное в соответствии с нужной концентрацией количество колхицина и растворяют его в допустимо малом объеме серного эфира. Этот раствор тщательно смешивают с взятым соответственно нужной концентрации количеством касторового масла. Смесь в колбе постепенно нагревают в водяной бане 1000 и держат так до тех пор, пока не выпарится эфир,что определяют по запаху. На удаление эфира тратится примерно 1 час.
Обычно колхицин применяют в растворах 0,1 – 0,2 % - ной концентрации. Иногда пользуются и более высокими концентрациями. В работах с косточковыми можно использовать отмеченные концентрации и испытывать действие других растворов.
Следует отметить ядовитость колхицина, почему при работе с ним необходимо соблюдать меры предосторожности. Специфика действия колхицина заключается в его влиянии на митоз, причем он вызывает частые нарушения митоза, проявляющиеся в образовании клеток тэтраплоидным набором хромосом, т.е. полиплоидных клеток.
Полиплоидные побеги, проростки и другие части растения обычно бывают более толстыми и укороченными, вследствие чего их можно отличить уже по морфологическим показателям. Точные результаты получаются при цитологическом изучении. Для обеспечения лучшего развития полиплоидных побегов остальные ближе расположенные побеги можно удалять или значительно ослаблять их рост.
Полиплоидные побеги отмечают этикеткой, за ними проводят многолетние наблюдения. Можно прибегать к прививке почек с полиплоидных побегов.
Применение колхицина и других мутагенов было незаслуженно задержано в селекционной работе с плодовыми, в том числе и косточковыми культурами. Поэтому в связи со значительным увеличением объема работ по мутагенезу, будет совершенствоваться методика искусственного образования мутаций и расширяться набор мутагенных факторов, что нужно будет учитывать исследователям, работающим в этом направлении.